在生物學(xué)和遺傳育種領(lǐng)域,表型是指構(gòu)成生物體的全部特征,包括外觀、基本維度、形態(tài)和顏色,是基因型和環(huán)境因素互相作用的結(jié)果。表型采集分析是指以定性和定量的方式測(cè)量這些特征。表型組(phenome)則是指某一生物的全部性狀特征,不僅局限于農(nóng)藝性狀,還包括植株所表現(xiàn)出來(lái)的生理狀態(tài)及生化組分。
隨著許多重要作物及植物全基因組測(cè)序的完成,科研人員對(duì)高通量、精準(zhǔn)、無(wú)損傷獲取植物表型信息的需求日益增加,功能完善的研究設(shè)施將成為推動(dòng)表型組學(xué)發(fā)展的加速器。國(guó)際上已經(jīng)在運(yùn)行的大型表型設(shè)施有100多套,最具有代表性的包括澳大利亞國(guó)家植物表型設(shè)施“植物加速器”、英國(guó)國(guó)家植物表型中心、德國(guó)Julich表型研究中心及德國(guó)IPK溫室自動(dòng)傳送表型平臺(tái)等。相對(duì)來(lái)說(shuō),我國(guó)的表型組學(xué)設(shè)施建設(shè)起步較晚,可采集分析的表型信息還比較有限。在此背景下,中國(guó)科學(xué)院遺傳與發(fā)育生物學(xué)研究所植物細(xì)胞與染色體工程國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室于2017年初建設(shè)了植物表型組學(xué)研究平臺(tái)(Plant Phenomics Analysis Platform, PPAP)。目前,該平臺(tái)已建設(shè)成為國(guó)內(nèi)采集分析植物表型信息相對(duì)較全面的研究設(shè)施之一,集成可見(jiàn)光成像、紅外成像、近紅外成像、根系近紅外成像、熒光成像、葉綠素?zé)晒獬上?、高光譜成像及激光雷達(dá)成像8個(gè)數(shù)據(jù)采集單元。在此基礎(chǔ)上,該平臺(tái)同時(shí)建立了根系表型采集分析技術(shù)、穗部性狀采集分析及抗逆性狀采集分析技術(shù)體系等。植物表型組學(xué)研究平臺(tái)是公共服務(wù)平臺(tái),致力于為國(guó)內(nèi)外從事植物研究的科研人員提供各類(lèi)表型采集分析服務(wù),包括但不限于地上部表型分析、根系表型可視化及分析等。
本文結(jié)合國(guó)內(nèi)外植物表型組學(xué)研究平臺(tái)建設(shè)與應(yīng)用方面的進(jìn)展,以PPAP為基礎(chǔ),從硬件基礎(chǔ)建設(shè)、各類(lèi)表型技術(shù)開(kāi)發(fā)及服務(wù)等方面介紹表型組學(xué)研究設(shè)施的技術(shù)應(yīng)用。
>> 平臺(tái)設(shè)施建設(shè) <<
PPAP位于中國(guó)科學(xué)院遺傳與發(fā)育生物學(xué)研究所西區(qū)溫室,建設(shè)面積為260 m2,由培養(yǎng)區(qū)和成像區(qū)組成(圖1)。其中,培養(yǎng)區(qū)包括植物的傳送區(qū)域、自動(dòng)稱(chēng)重灌溉設(shè)備、環(huán)境監(jiān)測(cè)傳感器等,用于植物材料的自動(dòng)化培養(yǎng)和環(huán)境信息記錄;成像區(qū)主要有大型機(jī)械臂帶動(dòng)的高光譜和激光雷達(dá)成像和基于成像暗室的可見(jiàn)光成像、紅外成像、近紅外成像、根系近紅外成像、熒光成像、葉綠素?zé)晒獬上駟卧?/span>整個(gè)設(shè)施可供300盆樣品進(jìn)行自動(dòng)傳送測(cè)定表型信息,可收集多個(gè)光譜譜段的圖像信息和光譜信息,同時(shí)收集樣品的三維點(diǎn)陣信息。
圖1 植物表型組學(xué)研究平臺(tái)鳥(niǎo)瞰圖
>> 技術(shù)應(yīng)用與服務(wù) <<
PPAP在硬件設(shè)施建設(shè)的基礎(chǔ)上,積極構(gòu)建各種作物的表型采集分析體系,為科研人員提供及時(shí)有效的技術(shù)支撐。目前該平臺(tái)已經(jīng)成功建立了根系可視化及表型分析技術(shù)、穗部性狀表型分析技術(shù)以及抗逆性狀表型分析技術(shù)等,已為多個(gè)研究機(jī)構(gòu)提供各項(xiàng)表型分析服務(wù)。
? 根系表型分析技術(shù)與服務(wù)
PPAP建立了一種用于高通量植物根系可視化分析的培養(yǎng)及測(cè)量技術(shù)體系(圖2),能夠通過(guò)根窗技術(shù)無(wú)損傷、可持續(xù)跟蹤觀測(cè)、原位采集土壤根系信息。利用該技術(shù)可以對(duì)作物根系進(jìn)行無(wú)損傷、高通量和全自動(dòng)根系表型分析,可測(cè)量分析參數(shù)如根冠結(jié)構(gòu)(包括跟深和冠幅等)、根冠面積和根長(zhǎng)等。
圖2 小麥在低磷和高磷不同處理下根系參數(shù)的采集分析
A:種植體系;B:圖像采集;C:圖像處理;D:根系參數(shù)提取分析。HP為高磷處理,LP為低磷處理。
? 穗部性狀表型分析技術(shù)與服務(wù)
PPAP利用可見(jiàn)光的顏色信息和紅外成像的溫度信息,擬合分析兩類(lèi)圖像獲得小麥、水稻的單株穗數(shù)。通過(guò)穗部的掃描圖像可以獲得穗部組成性狀,包括穗型、穗長(zhǎng)、每穗粒數(shù)、著粒緊密度和枝梗數(shù)目等(圖3)。
圖3 水稻穗部表型性狀采集分析示意圖
? 非生物脅迫表型鑒定分析技術(shù)與服務(wù)
PPAP通過(guò)采集植物在多個(gè)光譜下的光譜反射值,建立特定的圖像分析算法流程,可以動(dòng)態(tài)、定量分析植株在干旱、鹽脅迫及缺氮條件下表現(xiàn)出的生物量變化、葉片黃化面積、枯萎面積、葉片含水量的動(dòng)態(tài)變化、葉表溫度的變化等。通過(guò)對(duì)這些表型指標(biāo)的綜合分析,建立模型對(duì)應(yīng)到某個(gè)逆境脅迫過(guò)程植物的表型響應(yīng)過(guò)程。目前,該平臺(tái)已經(jīng)開(kāi)展了小麥和水稻(圖4)等作物在干旱、鹽脅迫、高溫等脅迫過(guò)程中的動(dòng)態(tài)表型分析服務(wù)。
圖4 不同基因型水稻在營(yíng)養(yǎng)脅迫條件下的生長(zhǎng)發(fā)育表型檢測(cè)分析
b2為一個(gè)水稻的基因型,Normal表示正常對(duì)照處理,Stress表示低氮處理。
表型組學(xué)是突破未來(lái)作物學(xué)研究和應(yīng)用的關(guān)鍵研究領(lǐng)域,通過(guò)表型采集分析可以為育種、栽培和農(nóng)業(yè)實(shí)踐提供基于大數(shù)據(jù)的決策支持。植物表型組學(xué)研究平臺(tái)是當(dāng)今植物科學(xué)研究發(fā)展所需要的重要基礎(chǔ)設(shè)施,對(duì)于推動(dòng)植物表型組學(xué)的發(fā)展具有重大意義。通過(guò)與基因組及可控環(huán)境數(shù)據(jù)的關(guān)聯(lián)分析,預(yù)期可以繪制各項(xiàng)生命活動(dòng)過(guò)程中的調(diào)控網(wǎng)絡(luò),最終揭示生命本身的奧秘,揭示農(nóng)作物的生長(zhǎng)發(fā)育規(guī)律,切實(shí)服務(wù)于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)。
胡偉娟, 凌宏清, 傅向東. 植物表型組學(xué)研究平臺(tái)建設(shè)及技術(shù)應(yīng)用. 遺傳, 2019, 41(11): 1060-1066.