花粉活力、花粉數(shù)量和花粉散粉的動(dòng)態(tài)變化是小麥育種的關(guān)鍵因素。溫度、光照、濕度、輻射、施用農(nóng)藥等不利環(huán)境條件都會(huì)對(duì)花粉活力、花粉數(shù)量以及散粉周期產(chǎn)生負(fù)面影響,從而導(dǎo)致授粉成功率降低,糧食產(chǎn)量下降。
—— 雜交制種過(guò)程中雄性品系的篩選 ——
雜交小麥?zhǔn)怯删奶暨x的自交系雜交而成。雜交小麥生產(chǎn)的挑戰(zhàn)在于雜交親本種子的選育和商品化增殖。小麥作為一種自花授粉作物,通常自然異交率極低,因此在小麥雜交制種過(guò)程中,進(jìn)行大規(guī)模、強(qiáng)制性的異花授粉是必須的。選擇能產(chǎn)生高質(zhì)量、高數(shù)量花粉的雄性品系,優(yōu)化雌性株系種植比例是保證異花授粉成功的關(guān)鍵。
傳統(tǒng)的花粉活力分析方法是基于染色或萌發(fā)法。但對(duì)小麥來(lái)說(shuō),其花粉壽命較短,且對(duì)液體極其敏感,遇水后花粉粒特別容易爆裂,因此這兩種方法都不適用于小麥、水稻等敏感花粉的分析。
Ampha Z32花粉活力分析儀無(wú)需染色、萌發(fā)等繁瑣的前處理過(guò)程,只需取用微量的花粉樣品添加少量緩沖液過(guò)濾后即可進(jìn)行測(cè)量,整個(gè)測(cè)量過(guò)程不超過(guò)2min,是一種可以快速、精準(zhǔn)、高效分析花粉活力的方法??蓱?yīng)用于:—— 分析花粉散粉動(dòng)態(tài)變化 ——上圖記錄了兩個(gè)小麥品種在兩天的固定時(shí)間間隔內(nèi)花粉散粉量的變化,灰色的點(diǎn)是同一區(qū)域內(nèi)單個(gè)花粉捕集器的花粉數(shù)量,測(cè)試每隔兩小時(shí)進(jìn)行一次,每天持續(xù)10小時(shí)。上圖為簡(jiǎn)易小麥花粉捕集器,由捕集器支架、50ml離心管、過(guò)濾器和漏斗組成。捕集器即插即拔,根據(jù)試驗(yàn)設(shè)置將捕集器固定到待測(cè)試小麥樣地即可。離心管中盛有能長(zhǎng)期穩(wěn)定花粉粒的AmphaCount計(jì)數(shù)緩沖液。另一種可以優(yōu)化雌雄植株比例的方法是對(duì)整株麥穗的花粉散粉量進(jìn)行量化。使用花粉隔離袋收集小麥花粉,圖中顯示了每穗小麥的散粉量,灰色點(diǎn)是單株麥穗的花粉量,不同顏色代表不同的小麥品種。量化整株麥穗的花粉量可以成為篩選雄性品系的一個(gè)附加指標(biāo)。評(píng)估小麥花粉散粉后的活力時(shí)效小麥花粉活力維持時(shí)間較短。在雜交小麥育種中,確保具有較高活力和較長(zhǎng)的壽命花粉由雄株傳至雌株是是否必要的。因此對(duì)不同小麥品系的花粉活力進(jìn)行評(píng)估并篩選出優(yōu)質(zhì)親本品系,是提高育種結(jié)果的有效手段。該圖記錄了小麥散粉后的花粉活力的變化,檢測(cè)時(shí)間間隔為10min。小麥花粉對(duì)溫度、光照、濕度、輻射、施用農(nóng)藥等非生物脅迫因素非常敏感,尤其是在開花期間,高溫會(huì)對(duì)花粉質(zhì)量產(chǎn)生明顯的負(fù)面影響,導(dǎo)致結(jié)實(shí)率下降。通過(guò)監(jiān)測(cè)高溫和干旱對(duì)花粉發(fā)育和成熟花粉品質(zhì)的影響,可以幫助篩選高抗高耐品系進(jìn)行育種。雙單倍體(DH)育種是一項(xiàng)重要的現(xiàn)代生物育種技術(shù),可大幅度縮短開發(fā)新品種所需的時(shí)間,加快植物育種計(jì)劃。Ampha Z32花粉活力分析儀可在DH育種過(guò)程的各個(gè)環(huán)節(jié)通過(guò)對(duì)大量樣品的測(cè)量,為DH育種決策提供可靠的數(shù)據(jù)支持,從而節(jié)約育種成本并顯著提高DH育種效率。- 區(qū)分小孢子不同的發(fā)育時(shí)期
區(qū)分小孢子不同的發(fā)育時(shí)期下圖為Ampha Z32花粉活力分析儀測(cè)量不同發(fā)育時(shí)期小穗的小孢子得到的相位-振幅散點(diǎn)分布的疊加圖。Y軸(振幅)上的偏移代表細(xì)胞體積的增長(zhǎng)。單核早中期是小麥DH育種的關(guān)鍵時(shí)期,準(zhǔn)確篩選單核期小孢子,對(duì)提高DH的生產(chǎn)效率而言是至關(guān)重要的。Ampha Z32花粉活力分析儀可在2min內(nèi)準(zhǔn)確測(cè)量分析上萬(wàn)個(gè)小孢子細(xì)胞,可監(jiān)測(cè)小孢子從單核早期到花粉脫落的整個(gè)發(fā)育過(guò)程,從而準(zhǔn)確篩選出處于單核早期至單核中期的小孢子,Ampha Z32花粉分析儀可應(yīng)用于DH育種中的常規(guī)監(jiān)測(cè)。麥穗不同部位甚至同一個(gè)小穗中都可能含有一系列處于不同的發(fā)育階段小孢子。小麥DH育種中需要選取處于在單核早中期的小孢子。用Ampha Z32可準(zhǔn)確鑒定正確發(fā)育階段,并在短時(shí)間內(nèi)測(cè)量大量的樣本,從而更高效且準(zhǔn)確地加快育種過(guò)程。如圖所示,麥穗不同穗位的小穗中單核、雙核和三核小孢子的比例不同。也就是說(shuō)不同小穗的小孢子處于不同的發(fā)育階段,即使同一個(gè)小穗也可能含有不同發(fā)育階段的小孢子。綜上,Ampha Z32花粉活力分析儀分析速度快、檢測(cè)通量高,不僅可應(yīng)用于大量品種間花粉活力測(cè)量、高溫敏感型種質(zhì)資源的篩選,還可指導(dǎo)生產(chǎn)者合理調(diào)整雌雄植株的種植比例,幫助育種者優(yōu)化DH育種策略,是一款可為農(nóng)業(yè)生產(chǎn)及科研決策,提供可靠數(shù)據(jù)支撐的測(cè)量工具。